正確進行培養(yǎng)基質(zhì)量控制,并作為一項經(jīng)常性的工作,建立完整的檢驗資料,是實驗室今后通過相應(yīng)級別的認證,在整個檢驗質(zhì)量控制體系中所必須具備的文件資料。
1、常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制
檢驗項目與方法:對新批號的干燥培養(yǎng)基物理、化學(xué)及生物學(xué)指標鑒定。
A:感官(外觀)研細程度和顏色(溶解前后),透明度,雜質(zhì)等。
B:PH測定,按各種培養(yǎng)基要求的PH±0.2,蒸餾水的PH應(yīng)在6.4-7.0之間。
C:生物學(xué)指標檢定,被檢培養(yǎng)基相應(yīng)細菌生長率測試;菌落大小及特征的檢測。
生長率測試:適用與液體和固體培養(yǎng)基:將菌培養(yǎng)液,用生理鹽水做倍比稀釋,取合適稀釋度進行平板計數(shù)或接種被檢的培養(yǎng)基試管,同時以按相關(guān)的培養(yǎng)基國標配方新鮮配制的培養(yǎng)基進行對照。不低與10%。
菌落大小測試:劃線分離測試菌,取10個菌落測量直徑大小,其直徑均值與新鮮配制的培養(yǎng)基無統(tǒng)計學(xué)差異。
2、常用培養(yǎng)基質(zhì)量標準
外觀和理化標準:
干粉顏色:淡黃色粉末或呈現(xiàn)本培養(yǎng)基te有的顏色。
溶解后培養(yǎng)基色澤:清晰透明(含瓊脂除外)淡黃色或te有的色澤。
滅菌后的培養(yǎng)基PH:7.2±2℃為多;個別弧菌檢驗用培養(yǎng)基pH值偏高為:8.0 ±2℃。
生物學(xué)指標:菌落特征及菌落大小 。
3、培養(yǎng)基保存環(huán)境
制成的培養(yǎng)基保存環(huán)境為4℃冰箱,如制成平板則用塑料袋包裝置冰箱保存。
干燥培養(yǎng)基干粉含有活性物質(zhì)、遇熱易分解的物質(zhì)應(yīng)仔細查看存放條件,多數(shù)也須放在2-8 ℃條件保存。
有的培養(yǎng)基則以存放于10-15 ℃條件為易。如含有高濃度膽鹽的培養(yǎng)基。
4、培養(yǎng)基制備控制程序
培養(yǎng)基配制所用的儀器設(shè)備培養(yǎng)基配制所用的儀器設(shè)備必須經(jīng)過相應(yīng)的鑒定 。
配制培養(yǎng)基所用的用具及容器配制培養(yǎng)基所用的用具及容器必須是清潔或是滅菌的,一些特殊不易洗刷清潔的玻璃器皿,必要時可用重鉻/酸鉀硫酸清潔浸泡后,取出置5%氫氧/化鈉溶液浸泡數(shù)分鐘,再用3%鹽酸溶液進行中和,然后用清水沖洗,烘干后備用。
5、培養(yǎng)基配制原料,試劑質(zhì)量控制
配制好的培養(yǎng)基(尤其是糖發(fā)酵管)不宜久放。因為培養(yǎng)培養(yǎng)基吸收空氣中的二氧化碳,會使培養(yǎng)基變酸,從而影響細菌的生長。
培養(yǎng)基中的抑制劑及指示劑一定要精確稱量,抑制劑要注意合理配伍。
6、培養(yǎng)基主要原料的質(zhì)量控制
配制培養(yǎng)基的主要原料有蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏、膽鹽、無機鹽和瓊脂等,這些主要原料的有劣,直接影響到培養(yǎng)基的質(zhì)量,由此也將影響檢驗質(zhì)量。