更新時(shí)間:2023-10-29
牛結(jié)核分歧桿菌(MB)核酸檢測(cè)試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39),ACTH(1-39),human>95%,BR恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39),大鼠ACTH (1-39), rat>95%,BRNCI-H838細(xì)胞,非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 大鼠正常肝
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:牛結(jié)核分歧桿菌(MB)核酸檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
編號(hào):BH-P96777
分類:熒光PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
OSMR Others Mouse 小鼠 OSMR / IL-31RB 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 陰丹酮Indanthrone
KB 口腔上皮癌細(xì)胞久洛尼定(>97.0%(GC)(T))Julolidine>97.0%(GC)(T)
MDA-MB-415腺癌細(xì)胞 MDA-MB-415 human breast adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基+15%FBS9-醛基久洛尼定(>98.0%(GC))9-Julolidinecarboxaldehyde>98.0%(GC)
TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標(biāo)簽)9,10-菲醌(>99.0%(GC))9,10-Phenanthrenequinone>99.0%(GC)
小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(MOPC)(5×105) Hep-2, 喉癌細(xì)胞系 Human菲啶(>98.0%(GC))Phenanthridine>98.0%(GC)
小型豬腎細(xì)胞;MPK草酸鈦鉀二水(>98%,BC)>98%,BCPotassium titanyl oxalate ,dehydrate
CCNE1 Others Mouse 小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 對(duì)苯二(>98%,BR)>98%,BRp-Phthaldehyde
神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)丙基紅(>80%,Ind Grade)>80%,Ind GradePropyl red
鯉魚尾鰭細(xì)胞;YZ16 皮膚基底細(xì)胞癌,TE 354.T細(xì)胞 Acc-2(涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞)吡唑(>98%,BR)>98%,BRPyrazole
急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞;THP-1靈芝1酸BHPLC>90%Ganoderenic acid B
牛結(jié)核分歧桿菌(MB)核酸檢測(cè)試劑盒CL-0388NCI-H157(非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2蘋果酸鈉500克
C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞 前列腺癌細(xì)胞,DU145細(xì)胞 SK-MES-1(肺癌細(xì)胞)3-乙酰脫氧瓜萎鐮菌醇 3-Acetyldeoxynivalenol,98% 50722-38-8 1MG 通用試劑
肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7L-天冬酰安;L-天冬減;L-天冬速;L-酰安天冬醋;L-天門冬酰安;L-2-安基琥珀醋酰安 L-cspcrcginq;L-β-cspcrcginq;L-cMinosuccincMic ccid;L-cspcrtic ccid β-MonocMidq;β-cMidq of cspcrtic ccid 70-47-3
CPM Others Human CPM / Carboxypeptidase M 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) metxylEosin甲基曙紅紅色粉末RTsigma
肝星形細(xì)胞RNAHHSteC miRNA5 μg4-甲基;勒披丁;勒匹丁;γ-甲基;4-甲基氮雜4-metxylinoneoline;γ- metxylinoneoline;Cincholepidine
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。