訂購(gòu)信息：
 產(chǎn)品名稱：登革熱病毒3型(DFV-III)核酸檢測(cè)試劑盒
規(guī)格：50T
編號(hào)：BH-P96923
分類：熒光PCR法
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
HEC-1-A(內(nèi)膜腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 獼猴皮膚細(xì)胞;MMS71酸二氫鉀（）Potassium Dihydrogen Phosphate比色法含量測(cè)定

髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;D341Med長(zhǎng)春胺（）Vincamine含量測(cè)定

EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) （）Imidapril HPLC法含量測(cè)定

MGC-803 胃癌細(xì)胞1酸（）Piperaquine phosphate含量測(cè)定

NCI-H1395肺腺癌細(xì)胞 Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1395 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS（）Cisapride Monohydrate含量測(cè)定
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-甲酰-DL-0.98Nalpha-Formyl-DL-tryptophan

CL-0396NCI-H226(肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2L-叔丁酯>98%,BRL-Tyrosine tert-butyl ester

CFR Others Human  CFR / CFR-alpha 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) O-芐基-L-0.98O-Benzyl-L-tyrosine

脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞RNAHCPEpiC miRNA5 μgN-乙酰-L-賴氨酸/N6-三氟乙酰基-L-賴氨酸>98%,BRN-6-Trifluoroacetyl-L-lysine

6T-CEM細(xì)胞，T細(xì)胞白血病 巨細(xì)胞性肺癌細(xì)胞,801-D細(xì)胞 細(xì)胞O-芐基-L->98%,BRO-Benzyl-L-serine
登革熱病毒3型(DFV-III)核酸檢測(cè)試劑盒心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HCMECL3-溴-1,10-鄰二氮雜菲(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)3-Bromo-1,10-phenanthroline

TIMD4 Others Human  TIMD4 / TIM4 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 5-氯-1,10-菲咯啉(>98.0%(T))>98.0%(T)5-Chloro-1,10-phenanthroline

BHK 敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞2-氯-1,10-鄰二氮雜菲(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)2-Chloro-1,10-phenanthroline

CL-0158MGC80-3(胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×24,7-二甲基-1,10-鄰二氮雜菲(>98.0%(T))>98.0%(T)4,7-Dimethyl-1,10-phenanthroline

mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 常春藤配基- 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷HPLC≥98%，V
檢測(cè)步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。