更新時間:2023-11-05
桑枝PCR鑒定試劑盒保存公司相關(guān)產(chǎn)品 Ruscogenin 472-11-7 分子式:C27H42O4 分子量:430.62大戟二烯醇 Euphol 大戟二烯醇 Euphol 514-47-6 分子式:C30H50O 分子量:426.70蝙蝠葛蘇林堿 Daurisoline 蝙蝠葛蘇林堿 Daurisoline 70553-76-3 分子式:C37H42N2O6
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱 | 桑枝PCR鑒定試劑盒保存 |
英文名稱 | Ramulus mori |
貨號 | BH-P99760 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提取:
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標本:取標本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
A431 人表皮癌細胞銀標準溶液(100µg/mL,基體:1%HNO3)Silver standard質(zhì)量規(guī)格:100µg/mL,基體:1%HNO3
PLC/PRF/5人肝癌亞力山大細胞 PLC/PRF/5 human hepatoma cell Alexander MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS鈧標準溶液(1000µg/mL,基體:10%HCL)Scandium standard質(zhì)量規(guī)格:1000µg/mL,基體:10%HCL
RSPO3 Protein Human 重組人 RSPO3 / R-spondin 3 蛋白 (aa 1-146, His 標簽)釤標準溶液(1000μg/ml)Samarium standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml
人骨骼肌細胞 (HSkMC)( 5×105 ) mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 Mouse錫標準溶液(1000μg/ml)Tin standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4A錫標準溶液(100μg/mL,基體: 10%HCl)Tin standard質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,基體: 10%HCl
綠色熒光蛋白標記小鼠前胃癌細胞;MFC-GFP釋放激素相關(guān)蛋白(1-13),人Gn-RH Associated Peptide (GAP) (1-13), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
HL-7702細胞,人肝細胞正常 人干細胞因子單克隆抗體細胞株,AMS2細胞 敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1海沙瑞林Hexarelin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細胞) 5×106cells/瓶×2組胺素5Histatin 5質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Promocell C-20011 Keratinocyte GrowthMedium 2, 角質(zhì)細胞生長培養(yǎng)基2型(即用型) 500ml高鈣血癥惡性因子(1-34)酰胺,人Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), amide, human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
人角膜細胞HK高鈣血癥惡性因子(1-34), 人Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
心肌細胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)噻嗪二酮(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Xanthiazone
CSNK1A1 Others Human 人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 噻嗪二酮苷(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Xanthiside
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12]多被銀蓮花皂苷R8(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Raddeanoside R8
MDA-MB-231細胞,癌細胞 人肝癌細胞,Bel-7402細胞 CL-00086T-CEM (人T細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2虎掌草皂甙D(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品無
倉鼠源細胞硫酸天仙子胺水合物質(zhì)量規(guī)格:美國進口Hyoscyamine Sulfate Hydrate
桑枝PCR鑒定試劑盒保存CM-H026人內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL疏水硅烷shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100u
HCT-8/VCR細胞,耐長春新堿結(jié)腸癌細胞系 人色素瘤細胞,HME6細胞 表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KBD-蘇酸 D-Theronine,≥98% 632-20-2 5G 通用試劑
H4(人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2異炳基錄化 ISOPROPYLMcGNqSIUM CHLORIDq 1068-22-9
CD274 Others Human 人 PD-
實驗流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。