更新時間:2023-11-08
馬鏈球菌(S. equi)核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品細胞;Hela P10s-11F1,3-二溴-7-叔丁基芘(>97.0%(GC))1,3-Dibromo-7-tert-butylpyrene>97.0%(GC)豚鼠源細胞 貓腎細胞,F(xiàn)81細胞 FDC-P1細胞,小鼠骨髓細胞6,12-二溴屈(>98.0%(HPLC))6,12-Dibromochrysene>98.0%(HPLC)
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:馬鏈球菌(S. equi)核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P96805
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
MOLT-4 急性母細胞白血病細胞蘋果酸舒尼替尼Sunitinib Malate>99.0%,BR
NCI-H1975肺腺癌細胞 Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1975 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS蘋果酸舒尼替尼()Sunitinib MalateHPLC>98%,
ADIPOQ Protein Mouse 重組小鼠 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (His 標簽)舒洛芬Suprofen>98%
SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞;WI38/VA13 胰島β細胞*培養(yǎng)基 100mLTacrolimus /FK506 monohydrate≥98%,細胞培養(yǎng)級
內(nèi)膜腺癌細胞;HEC-1-B()Tacrolimus /FK506 monohydrate≥98%,
MDA-MB-415 腺癌細胞()HPLC≥98%,Palmatine
HFL1胚肺成纖維細胞 HFL1 in human embryo lung fibroblasts F12K培養(yǎng)基+10%FBS鹽酸西那卡塞;鹽酸甲狀旁腺激素>99%,BRCinacalcet HCl,AMG073
SCGB1A1 Protein Mouse 重組小鼠 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 (His 標簽)≥97%,BRPalmatine
胚腎二倍體細胞;CCC-HEK-1 氣管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL/鏈絲菌蛋白酶/鏈霉菌蛋白酶BR,4000u/mg,進分Pronase E
小鼠骨髓瘤細胞;Sp2/0-Ag14粉防己堿;()HPLC≥98%,Tetrandrine
馬鏈球菌(S. equi)核酸檢測試劑盒RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元堿性氧化鋁1公斤
胚胎心臟成纖維樣細胞;HEH2 成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL膽減氧化酶(-20℃) CHOLINq OXIDcSq 908-67-2
表皮角質(zhì)細胞-新生HEK-nN,N'-羰基二咪唑 1,1'-Carbonyldiimidazole (CDI) 530-62-1 10G 通用試劑
RK2 Others Rat 大鼠 kB / RK2 細胞裂解液 (陽性對照) 鈉測試盒(帶標準)10個RT
大鼠直腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL(dNTP混合物)
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。