公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

     b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項(xiàng) 

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠小腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠髓鞘關(guān)聯(lián)糖蛋白(MAG)ELISA試劑盒 NGAL  大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白 96T

NF-M： 中分子量神經(jīng)絲蛋白抗體 S-180細(xì)胞，腹水瘤細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,CRL-2780細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO

IL17RC Others Human 人 IL17RC 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 Hp-IgG  大鼠幽門螺旋菌IgG 96T

Necdin： 生長抑制蛋白NDN抗體 上皮細(xì)胞生長添加物-2EpiCGS-2

CNE人鼻咽癌細(xì)胞 Human nasopharyngeal carcinoma cell line CNE 1640+10%FBS 大鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒 IL-10(Human Interleukin 10)  人白介素10 96T

人子宮平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人艾柯病毒IgM(ECHO IgM)ELISA 試劑盒 PAK7/PAK5/MBT 激活激酶PAK7/PAK5抗原 0.5mg

IL-10RA： 白細(xì)胞介素-10受體a抗體 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A 人肺癌細(xì)胞，NCI-H838[H838]細(xì)胞 BGC-823(胃腺癌細(xì)胞(低分化))

CD99 Others Rat 大鼠 CD99 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人艾杜糖酯酶(IDS)ELISA 試劑盒 PAR-1 (Protease-activated receptors-1) 激活受體-1抗原 0.5mg

IL-13Ra1： 白細(xì)胞介素-13受體a1抗體 CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

C127細(xì)胞，小鼠細(xì)胞 Y1(腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞) 人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5 人癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA 試劑盒 PAR-2 (Protease-activated receptors-2) 激活受體-2抗原 0.5mg

ME-180人子宮頸表皮癌細(xì)胞人支氣管上皮樣細(xì)胞;BEAS-2B 人卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA 試劑盒 cAMP(Human cyclic adenosine monophosphate)  人環(huán)0酸腺苷 96T

Rheumatoid Factor： 類風(fēng)濕因子抗體 原代內(nèi)皮細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml

RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞 大鼠補(bǔ)體成分9(C9)ELISA試劑盒 MASP(Human mannan binding lectin associated serine protease)  人甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲酸 96T

RPE65： 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞特異性蛋白65抗體 TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

U87MG 人惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 大鼠補(bǔ)體成分5a(C5a)ELISA試劑盒 CDK-7(Human Cyclin-dependent kinase 7)  人周期素依賴性激酶7 96T