公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

     b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項(xiàng) 

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

music Acetylcholine Receptor 1： 毒蕈堿型乙酰受體M1抗體 QGY-7703細(xì)胞，肝癌細(xì)胞 表皮癌細(xì)胞系,A431細(xì)胞 小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤;M5076

LRP10 Others Human 人 LRP10 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠線粒體鐵蛋白(FTMT)ELISA試劑盒 TRAP-5b (Rabbit) 兔0酸酶TRAP-5b ELISA試劑盒 96T

MAG： 髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體 人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞總RNAHBdSF NA

Pt K1 (NBL-3)袋鼠腎細(xì)胞 Pt K1 (NBL-3) kangaroo kidney cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS 大鼠線粒體解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)ELISA試劑盒 LCA/CD45(Human leukocyte common antigen)  人白細(xì)胞共同抗原 96T

MEK1 + MEK2： 原活化蛋白激酶激酶1抗體 CD38 Others Mouse 小鼠 CD38 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人胰腺星狀細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人多肽YY(Peptide-YY)ELISA 試劑盒 phospho GAP-43(pSer41)(phospho Growth associated protein 43 ) 0酸化神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43抗原 0.5mg

BRI3BP： 原基因1/bri3結(jié)合蛋白抗體 白牦牛皮膚細(xì)胞;Yak-2 橫紋肌瘤細(xì)胞，A673細(xì)胞 NAMALWA(Butt's 淋巴瘤細(xì)胞)

MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)ELISA 試劑盒 GAPDH 3-0酸甘油醛脫氫酶(人)抗原 0.5mg

HCV Core protein： 丙肝病毒核心抗原C區(qū)抗體 T-109B彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL

BJ細(xì)胞，人皮膚成纖維細(xì)胞系 克柔念珠菌 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B2 人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA 試劑盒 CXCR3/CD183 peptide 細(xì)胞表面趨化因子受體3抗原 0.5mg

HS683人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞Phospho-p90RSK (Ser380)： 0酸化絲酸/蘇酸激酶p90RSK蛋白抗體 D341 Med細(xì)胞，人髓母細(xì)胞瘤 人癌細(xì)胞,BCaP-37細(xì)胞 心肌細(xì)胞培養(yǎng)基CMM-prf

CD6 Others Mouse 小鼠 CD6 / TP120 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒 iso-Hyd(Human Isoprenaline Hydrochloride)  人異丙 96T

Phospho-p90RSK (Thr359 + Ser363)： 0酸化絲酸/蘇酸激酶p90RSK蛋白抗體 CM-H012人支氣管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

hFOB 1.19人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞 The hFOB 1.19 SV40 was ansfected io osteoblasts DMEM/F12(1:1)+10% FBS+300μg/ml G418 大鼠氧化酶(DAO)ELISA試劑盒 NT-3  大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3 96T

Phospho-p90RSK (Thr573)： 0酸化絲酸/蘇酸激酶p90RSK蛋白抗體 IL2RA Others Human 人 IL2Ra / CD25 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)